產(chǎn)品細(xì)節(jié)圖:

GO3000 HiTrans轉(zhuǎn)染試劑1ml

品牌：ECOTOP | 貨號(hào)：EK-5401-1ml

所屬大類 : 試劑

所屬小類 : 細(xì)胞培養(yǎng)試劑

品牌 : ECOTOP

規(guī)格 : 1ml

原價(jià) : ￥350.00

促銷價(jià) : ￥350.00

GO3000 HiTrans Reagent

【保存條件】

-20oC 保存 2 年

【概述】

1. Ecotop 品牌高效轉(zhuǎn)染試劑（GO3000 HiTrans Reagent），適用于真核哺乳動(dòng)物細(xì)胞轉(zhuǎn)染，有毒性低、轉(zhuǎn)

染效率高等特點(diǎn)。

2. 適用于：293T/293A/HEK293/CHO/Hela 等哺乳動(dòng)物細(xì)胞，轉(zhuǎn)染效率可高達(dá) 90%以上。通常 293 細(xì)胞轉(zhuǎn)

染效率可以高達(dá) 90%以上。大多數(shù)常見的細(xì)胞例如 Hela 細(xì)胞、CHO 細(xì)胞等也都適合用該試劑轉(zhuǎn)染，

但效率比 293 細(xì)胞要略低一些。

3. 應(yīng)用：細(xì)胞瞬時(shí)轉(zhuǎn)染、慢病毒包裝、腺病毒包裝、AAV 病毒包裝、逆轉(zhuǎn)錄病毒包裝

4. 本試劑經(jīng)過 0.22μm 過濾器除菌處理，可直接使用。

【操作方法】

1. 對(duì)于貼壁細(xì)胞（以下均以 6 孔板為例，其它培養(yǎng)皿或培養(yǎng)板請(qǐng)根據(jù)相應(yīng)面積換算）：

a. 將細(xì)胞培養(yǎng)于培養(yǎng)皿或培養(yǎng)板內(nèi)，通常在鋪板后 1-2 天內(nèi)長到 70-90%。

b. 在轉(zhuǎn)染前 1-2 小時(shí)，吸去細(xì)胞培養(yǎng)液，更換為新鮮的不含抗生素的完全培養(yǎng)液 2ml。

c. 取 2-4μg 待轉(zhuǎn)染的質(zhì)粒 DNA (質(zhì)粒總體積不宜超過 20μl，若有多種質(zhì)粒請(qǐng)混勻)，以質(zhì)量體積比 1：3 加

入轉(zhuǎn)染試劑 6~12μl（如 2μg 待轉(zhuǎn)染的質(zhì)粒 DNA 加入轉(zhuǎn)染試劑 6μl）。

d. 混勻后，室溫孵育 3-5 分鐘。

e. 把 DNA-轉(zhuǎn)染試劑混合物中加入 500μl opti-MEM（若無 opti-MEM 可使用無血清無雙抗的 DMEM 或 1640，

具體根據(jù)轉(zhuǎn)染細(xì)胞使用的培養(yǎng)基）,充分混勻后靜置 10-15 分鐘。

f. 后均勻滴加到整個(gè) 6 孔板內(nèi)（加入前吸出原培養(yǎng)板中 500μl 培養(yǎng)基），并置于含 5%二氧化碳的 37oC 細(xì)胞

培養(yǎng)箱內(nèi)培養(yǎng)。

g. 在轉(zhuǎn)染后 4-6 小時(shí)左右換液，更換為 2ml 新鮮的完全培養(yǎng)液，繼續(xù)培養(yǎng)。

h. 通常在轉(zhuǎn)染約 24-48 小時(shí)后就可以檢測(cè)到轉(zhuǎn)染基因的表達(dá)。

2. 對(duì)于懸浮細(xì)胞：www.ecotopbio.com

a. 離心收集懸浮細(xì)胞，用 PBS 洗滌一次。

b. 按照上面的步驟 c)、d)、e）制備 DNA-轉(zhuǎn)染試劑-optiMEM 混合物。

c. 每 106 個(gè)細(xì)胞的沉淀，用 500 微升 DNA-轉(zhuǎn)染試劑-optiMEM 混合物重新懸浮，室溫放置 15-20 分鐘。

d. 在一個(gè) 6 孔板孔內(nèi)加入 1.5ml 完全培養(yǎng)液，然后加入來自上一步的細(xì)胞-500 微升 DNA-轉(zhuǎn)染試劑-optiMEM

混合物，混勻。

e. 在含 5%二氧化碳的 37oC 細(xì)胞培養(yǎng)箱內(nèi)培養(yǎng)。

f. 根據(jù)實(shí)驗(yàn)要求和轉(zhuǎn)染試劑對(duì)于不同細(xì)胞的毒性不同，在 4-6 小時(shí)后離心收集細(xì)胞，用 PBS 洗一次，然后

用 2 毫升完全培養(yǎng) 液重新懸浮細(xì)胞，繼續(xù)培養(yǎng)。

g. 通常在轉(zhuǎn)染約 24-48 小時(shí)后就可以檢測(cè)到轉(zhuǎn)染基因的表達(dá)。

十二烷基磺酸鈉與十二烷基硫酸鈉的區(qū)別
實(shí)驗(yàn)室中的化學(xué)試劑的防護(hù)之十二烷基硫酸鈉
十二烷基硫酸鈉（SDS）的生物應(yīng)用

GO3000 HiTrans轉(zhuǎn)染試劑1ml的說明書1

1.《Multifunction Sr, Co and F co-doped microporous coating on titanium of antibacterial, angiogenic and osteogenic activities》
作者：Jianhong Zhou ,Lingzhou Zhao 影響因子：4.259
期刊：《Scientific Reports 6, Article number: 29069 (2016)》 PMID：27353337

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GO3000 HiTrans轉(zhuǎn)染試劑1ml

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