Tris-Tricine-SDS-PAGE Loading Buffer,2×(with DTT)

【保存條件】 

建議分裝凍存，避免反復(fù)凍融，-20℃，有效期 1 年 

【概述】 

2×Tris-Tricine-SDS-PAGE 上樣緩沖液 (含 DTT)用于 Tricine-SDS-PAGE 電泳時作蛋白質(zhì)上樣用。其主要成份為 SDS，DTT，考馬斯亮藍，緩沖鹽溶液等。SDS 可與蛋白質(zhì)結(jié)合使蛋白質(zhì)－SDS 復(fù)合物上帶有大量的負(fù)電荷，這時蛋白質(zhì)本身的電荷完全被 SDS 掩蓋，消除 了各種蛋白質(zhì)本身電荷的差異，SDS 還可以斷開分子內(nèi)和分子間的氫鍵，破壞蛋白質(zhì)分子 的二級和三級結(jié)構(gòu)，DTT 可以斷開半胱氨酸殘基之間的二硫鍵，破壞蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)，消除了 蛋白結(jié)構(gòu)之間的差異。最終無電荷及結(jié)構(gòu)上差異的蛋白（亞單位），電泳速度只是與其分子 量大小有關(guān)。考馬斯亮藍作為指示劑，用于追蹤電泳進度。 

【使用建議】 

1. 室溫解凍 2×Tris-Tricine-SDS-PAGE 上樣緩沖液。 

2. 請按每 10μl 蛋白樣品加入 10μl 上樣緩沖液的比例(兩倍稀釋)來使用。如果蛋白樣品濃度 過高，可用雙蒸水稀釋。 

3. 混勻后，100℃水浴加熱 5-10 分鐘，使蛋白變性。 

4. 冷卻至室溫后，10000-14000rpm 離心 2-5 分鐘，取上清直接上樣電泳即可。 

【注意事項】 

1. DTT 對人體有害，操作時請小心，并注意有效防護以避免直接接觸人體或吸入體內(nèi)。 

2. 為了您的安全與健康，請穿實驗服并戴一次性手套操作。