Bis-Tris Sample buffer,2×(with DTT)

【保存條件】 

-20℃避光保存，有效期 1 年。建議分裝凍存，避免反復(fù)凍融。 

【概述】 

2×NeoPAGE 蛋白電泳上樣緩沖液可保護(hù)蛋白質(zhì)在樣品制備步驟中免受熱降解，并在 NeoPAGE 凝膠電泳運(yùn)行期間防止 pH 值變化。一些蛋白質(zhì)對(duì)在電泳期間溫度波動(dòng)引起的 pH 變化敏感，優(yōu)化后的上樣緩沖液組分可防止在電泳之前的樣品加熱過(guò)程中以及電泳過(guò)程中蛋 白質(zhì)降解。SDS 可與蛋白質(zhì)結(jié)合使蛋白質(zhì)-SDS 復(fù)合物上帶有大量的負(fù)電荷，這時(shí)蛋白質(zhì)本 身的電荷完全被 SDS 掩蓋，消除了各種蛋白質(zhì)本身電荷的差異；SDS 還可以斷開(kāi)分子內(nèi)和 分子間的氫鍵，破壞蛋白質(zhì)分子的二級(jí)和三級(jí)結(jié)構(gòu)。DTT 可以斷開(kāi)半胱氨酸殘基之間的二 硫鍵，破壞蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)，消除了蛋白結(jié)構(gòu)之間的差異。最終無(wú)電荷及結(jié)構(gòu)上差異的蛋白（亞 單位），電泳速度只是與其分子量大小有關(guān)。上樣緩沖液的跟蹤染料為考馬斯亮藍(lán) G-250（藍(lán) 色），用于跟蹤電泳的進(jìn)度。 

【使用建議】 

1. 使用前請(qǐng)室溫完全解凍上樣緩沖液并搖勻。 

2. 請(qǐng)按每 10μl 蛋白樣品加入 10μl 上樣緩沖液的比例(兩倍稀釋)來(lái)使用。如果蛋白樣品濃度 過(guò)高，可用雙蒸水稀釋。 

3. 混勻后，90-100℃水浴加熱 5-10 分鐘，使蛋白變性。 

4. 冷卻至室溫后，10000-14000rpm 離心 2-5 分鐘，取上清直接上樣電泳即可。 

【注意事項(xiàng)】 

1. 為了您的安全與健康，請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。