產品細節圖:

NewZOL LS 總RNA提取試劑(NewZOL LS Reagent) 200ml

品牌：ECOTOP | 貨號：EK-5303-200ml

所屬大類 : 試劑

所屬小類 : 常用生化試劑

品牌 : ECOTOP

規格 : 200ml

原價 : ￥890.00

促銷價 : ￥890.00

功能與使用方法與life品牌的Trizol LS相似

【保存條件】

2-8℃長期保存

【操作方法】

I. 樣本處理

1. 組織樣本處理：用勻漿器或其他類似設備勻化組織樣本機械破壞裝置，每 500μL 最多使用 50 mg 組織NewZOL LS。對于 DNA 含量高的組織（例如脾臟），建議使用 25 mg 組織/ 500μL 試劑。

2. 貼壁細胞樣本處理：除去細胞培養基，通過向培養皿（直徑 3.5 cm，10 cm2）中加入至少 1 mL NewZOLLS 并通過反復吸移來確保完全裂解。（根據培養皿面積而不是細胞數計算試劑量。試劑量不足將導致分離的 RNA 受到 DNA 污染。殘留的勻漿可以在-20 至-80°C 下保存至少一年，以備后用。）

3. 懸浮細胞樣本處理：沉淀細胞，并通過添加 NewZOL LS 直接裂解。每 5×106個細胞至少加入 500μLNewZOL LS，移液器吹打數次裂解細胞。（添加 NewZOL LS 之前請勿洗滌細胞，細胞洗滌可能會導致 RNA降解。）

4. 液體樣本處理：每 200μL 液體樣品中加入 500μL NewZOL LS 進行均質化和裂解。對于小于 200μL 的樣品體積，請添加 500μLNewZOL LS 并加水至最終體積為 700μL。

5. 富含脂質樣本處理：如上所述均質化富含脂質的樣品。將樣品以 12,000×g 離心 5 分鐘。離心后，樣品頂部會出現一層脂肪。用移液器吸頭尖端刺穿上層，然后將上清液轉移到新管中。

II. RNA 提取

1. 每使用 500μLNewZOL LS 的裂解液中加入 200μL 無 RNase 的水至裂解液中。劇烈搖動樣品 15 秒鐘。在室溫下孵育 5 分鐘。（對于包含 50 mg 組織/ 500μL NewZOL LS 的樣品，建議在室溫下孵育 15 分鐘。）

2. 在室溫下以12,000×g離心樣品15分鐘。含有DNA，蛋白質和多糖的半固體沉淀物形成在試管底部。RNA仍溶解在上清液中。

3. 將 500μL 上清液轉移至新管中。勿吸太干凈防止污染，在 DNA /蛋白質沉淀上方保留一小部分上清液。

（含有 DNA，蛋白質和多糖的沉淀物占勻漿-水混合物總量的約 10％。）

4. 加入等體積異丙醇，上下顛倒混勻以沉淀 RNA，在室溫下孵育樣品 10 分鐘。

5. 將樣品以 12,000×g 離心 10 分鐘，除去并丟棄上清液。通常，在管的底部以白色沉淀的形式獲得 RNA。對于脾臟樣品，RNA 在試管底部形成凝膠狀膜。用乙醇洗滌后，膜變得更可見。

6. 加入 500μL 75％乙醇（無 RNase 水配制）洗滌，輕彈管底使沉淀懸浮，上下顛倒混勻。對于較大的試管，按比例添加 75% 乙醇溶液。

7. 將沉淀以 8,000×g 的速度離心 3 分鐘。移液去除沉淀中的乙醇，重復乙醇洗滌步驟一次。靜置 5-10 分鐘待乙醇揮發，無需過份干燥成固體，干燥成固體的 RNA 沉淀不易溶解

8. 將 RNA 沉淀溶于無 RNase 的水中，在室溫下渦旋 3 分鐘，以實現有效溶解。將得到的 RNA 進行檢測或-65℃長期保存（若需更長時間保存請添加適量 RNA Chill（ES-8520））。

【注意事項】

1. RNA 酶污染注意事項：

a. 提取過程用品均經過去 RNA 酶處理：玻璃制品可以 150 °C 烘烤 4 小時，塑料制品可浸泡于 0.5M NaOH 溶液后用清水沖洗并高壓滅菌，吸頭及離心管類盡量使用一次性無酶吸頭及離心管

b. 佩戴手套及口罩及護目鏡：皮膚上常含有細菌和霉菌，可污染 RNA 制備，且同時是 RNA 酶來源，同時 New ZOL LS 對皮膚有一定毒性，建議佩戴手套及口罩及護目鏡。

c. 盡量于通風櫥內提取：避免吸入提取過程中有毒物質。

2. 安全性問題：

a. 本品在與皮膚接觸及吞咽有毒性，可導致燒傷。與皮膚接觸后，應立即用洗滌劑和大量水沖洗。

如感到身體不適，應立即就醫

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1.《Multifunction Sr, Co and F co-doped microporous coating on titanium of antibacterial, angiogenic and osteogenic activities》
作者：Jianhong Zhou ,Lingzhou Zhao 影響因子：4.259
期刊：《Scientific Reports 6, Article number: 29069 (2016)》 PMID：27353337

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NewZOL LS 總RNA提取試劑(NewZOL LS Reagent) 200ml

品牌：ECOTOP | 貨號：EK-5303-200ml

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